熒光蛋白激發(fā)光源 熒光激發(fā)光源手電筒 雙波段熒光蛋白激發(fā)光源
熒光顯微鏡激發(fā)熒光的方式有哪些
熒光顯微鏡是科研、病理、檢驗等部門常用的醫(yī)用光學(xué)儀器之一。因為普通的顯微鏡是在明亮的背景上觀察暗物，而熒光顯微鏡是在暗背景下觀察彩色的圖像，因此它比普通的顯微鏡分辨力提高100倍，可以觀察到普通顯微鏡看不到的細(xì)節(jié)。但是它的調(diào)整，校正難度較高，只要解決了熒光顯微鏡的問題，其它顯微鏡問題就迎刃而解。
激發(fā)光源是熒光顯微鏡主要組成部分，熒光顯微鏡都采用200W的超高壓汞燈作激發(fā)光源。它是由石英玻璃制作，中間呈球形，內(nèi)充有一定量的汞，工作時在兩極間放電，引起水銀蒸發(fā)，球內(nèi)氣壓迅速升高，當(dāng)水銀完全蒸發(fā)時，可達(dá)50～70個標(biāo)準(zhǔn)大氣壓力，這一過程一般約5～15min。超高壓汞燈的發(fā)光是電極間放電使水銀分子在不斷解離和還原過程中發(fā)射光量子的結(jié)果。它發(fā)射很強(qiáng)的紫光，足以激發(fā)各類熒光物質(zhì)，因此被熒光顯微鏡普遍采用。
熒光顯微鏡激發(fā)熒光的方式：
按光的波長范圍分為UV激發(fā)法(使用紫外線照明法)和BV激發(fā)法(使用藍(lán)紫光)兩種。
UV激發(fā)法是用短于400nm紫外光進(jìn)行激發(fā)。該法不存在可見的激發(fā)光，所以被觀察的熒光呈現(xiàn)該染料固有的熒光，容易判別標(biāo)本上的特異熒光和背景組織的自身熒光。
BV激發(fā)法是以404nm、434nm為中心的由紫外至藍(lán)光進(jìn)行激發(fā)。該方法使用藍(lán)光照射標(biāo)本，所以熒光顯微鏡的截止濾光片必須使用可完全阻斷藍(lán)光并可充分通過所需綠、黃熒光的濾光片。用于熒光抗體法的熒光色素。對于激發(fā)光的極大吸收波長和熒光的極大發(fā)光波長比較接近，所以BV激發(fā)法使用的濾光片必須使用銳截止式濾光片。該法可用藍(lán)光作為激發(fā)光，所以熒光色素的吸收效率較高，可得到較明亮的圖像。其缺點(diǎn)是500nm以下的熒光無法看到，而500nm以上的使整個圖像顯黃色。在熒光抗體法中，大多以熒光色素特有的顏色來判斷其特異性，所以在討論微妙的特異性時，上述BV激發(fā)法的缺點(diǎn)往往影響極大。
