柱前衍生與柱后衍生的比較
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hzjiawei 發(fā)布時(shí)間:2021-11-30 10:40:55
HPLC分析中,樣品需要衍生化處理的目的在于將不適用于液相色譜分析的物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)橐子诜治龅难苌?,通過改善化合物的物理化學(xué)性能從而改變其選擇性,提高待分析物的檢測靈敏度,常用的方法是給不能被檢測物質(zhì)的結(jié)構(gòu)中加入發(fā)色團(tuán),使其能夠被檢測。柱前衍生是目前應(yīng)用廣泛的衍生技術(shù)。
柱前衍生是指待測物在液相色譜分離前就完成衍生化,再根據(jù)衍生物的性質(zhì)進(jìn)行色譜分離檢測,若衍生過程所用的試劑若能穩(wěn)定存在,且衍生反應(yīng)條件成熟可靠時(shí),其優(yōu)勢體現(xiàn)在對設(shè)備要求不高,可以人工衍生,且衍生后的副產(chǎn)物可以經(jīng)過預(yù)處理步驟除去,相應(yīng)的,手工衍生化過程會受到人為因素的影響。
柱后衍生是指待測物先經(jīng)過色譜分離后,然后進(jìn)入反應(yīng)器中與衍生化試劑反應(yīng),后進(jìn)入檢測器的衍生化方法。該方法可以實(shí)現(xiàn)分析的自動化,反應(yīng)重現(xiàn)性好,不影響被測物的色譜行為,但不利點(diǎn)在于需要配備額外的反應(yīng)裝置和反應(yīng)設(shè)備,過長的設(shè)備管線會使從色譜柱中出來的樣品在管路中造成峰擴(kuò)展,導(dǎo)致分離度降低。
柱后衍生又稱柱后反應(yīng),利用衍生反應(yīng)使被測物與相應(yīng)的試劑分析反應(yīng),以改變其物理或化學(xué)性質(zhì),使其被檢測到。例如將發(fā)色基團(tuán)或熒光基團(tuán)鍵合到樣品中去,多極放大檢測靈敏度,柱后衍生系統(tǒng)開創(chuàng)了柱后衍生系統(tǒng)性能、價(jià)格及外形的新標(biāo)準(zhǔn)。反應(yīng)器設(shè)計(jì),造就了新一代柱后衍生系統(tǒng)高性能和低價(jià)格。
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