組織勻漿管線式高剪切均質機
一、組織破碎
組織破碎提取法是在室溫液體溶劑中利用高速破碎、高速研磨、高速攪拌和超分子滲透技術,數(shù)分鐘內對藥材進行組織破碎、研磨至細微顆粒,從而達到快速提取的效果。
二、機械法高剪切組織勻漿的制備
1、取組織塊(0.2g~1g)少可到2~5mg,在冰冷的鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,稱重,放入5或10ml的小燒杯內
2、用移液管量取預冷的勻漿介質(ph7.4,0.01mol/L?Tris-HCL,?0.0001MOL/LEDTA-2Na,0.01mol/L蔗糖0.8%的氯化鈉溶液)或者用0.86%冷鹽水,勻漿介質或鹽水的體積總量應該是組織塊重量的9倍,用移液管或移液器取總量的2/3的勻漿介質或鹽水于燒杯中,用眼科小剪盡快剪碎組織塊(天然時操作要在冰水浴中進行,將盛有組織的小燒杯放入冰水中)。
3、勻漿的方式有多種:手工勻漿、機器勻漿、超聲勻漿、反復凍融。
手工勻漿:將剪碎的組織倒入玻璃勻漿管中,再將剩余的1/3勻漿介質或鹽水沖洗殘留在燒杯中的碎組織塊,一起倒入勻漿容器中進行勻漿,左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手將搗桿垂直插入套管中,上下轉動研磨數(shù)十次(6~8分鐘),充分研碎,使組織勻漿化。?機器勻漿:用組織搗碎機10000~28000r/min上下研磨制成10%組織勻漿,也可用內切式組織勻漿機制備(勻漿時間10秒/次,間隙30秒,連續(xù)3~5次,在冰水中進行),皮膚、肌肉組織等可延長勻漿時間。
超聲粉碎:用超聲粉碎機進行粉碎,可用Soniprep150型超聲波發(fā)生器以振幅14微米超聲處理30秒使細胞破碎,也可用國產(chǎn)超聲波發(fā)生儀,用40安培,5秒/次,間隙10秒反復3~5次。?反復凍融:培養(yǎng)或者分離的細胞可以用以上的方法勻漿,也可以反復凍溶3次左右(即讓細胞加適量的低滲液或者雙蒸水放低溫冰箱中結冰,溶解,再結冰,再溶解,反復3次左右),但有部分酶活力會受影響。
取少量組織勻漿做涂片(直接涂片、染色均可),顯微鏡下觀察細胞是否磨破,若沒有破則可以延長勻漿時間或增加凍融次數(shù)。
4、將制備好的10%勻漿用普通離心機或低溫低速離心機3000r/min左右離心10~15分鐘,若檢測ATP酶,則只需要1000轉/分,離心5分鐘,將離心好的勻漿留下上清棄下面沉淀。?根據(jù)你的實驗需要,取適量上清夜進行各種測定。
三、組織勻漿管線式高剪切均質機
XMD2000/4是一款集研磨、分散、均質、乳化于一體的分散設備,在多個領域和行業(yè)有著突出的應用。如化工行業(yè):白炭黑、環(huán)氧樹脂等超細研磨分散機;食品行業(yè):植物蛋白飲料、膠原蛋白提取等;都可以獲得良好的研磨分散細化的效果。
XMD2000/4研磨分散機,電機功率:4kw,轉速高達18000rpm,處理在0-300L,設備體積較小,可直接放置實驗臺上操作。專為實驗室研發(fā),模擬生產(chǎn)流程,為量產(chǎn)提供可靠的數(shù)據(jù)論證。該中試型型機器和大型量產(chǎn)機型配置相同,且分散頭的種類及相應線速度也相同,中試過程中的工藝參數(shù)在量產(chǎn)化之后不要重新調整,而將機器型號升級過程中的風險降到更低。
XMD2000/4研磨分散機是由膠體磨+分散機一體化而成的設備,先研磨后分散,效率高效果好。
設備結構:
研磨分散機是由膠體磨分散機組合而成的高科技產(chǎn)品。
第一級由具有精細度遞升的三級鋸齒突起和凹槽。定子可以無限制的被調整到所需要的轉子之間距離。在增強的流體湍流下。凹槽在每級口可以改變方向。
第二級由轉定子組成。分散頭的設計也很好的滿足不同粘度的物質以及顆粒粒徑的需要。在線式的定子和轉子(乳化頭)和批次式機器的工作頭設計的不同主要是因為在對輸送性的要求方面,特別要引起注意的是:在粗精度、中等精度、細精度和其他一些工作頭類型之間的區(qū)別不光是指定轉子齒的排列,還有一個很重要的區(qū)別是不同工作頭的幾何學征不一樣。狹槽寬度以及其他幾何學特征都能改變定子和轉子工作頭的不同功能。
以下為型號表供參考:
型號 |
標準流量 L/H |
輸出轉速 rpm |
標準線速度 m/s |
馬達功率 KW |
進口尺寸 |
出口尺寸 |
XMD2000/4 |
400 |
18000 |
44 |
4 |
DN25 |
DN15 |
XMD2000/5 |
1500 |
10500 |
44 |
11 |
DN40 |
DN32 |
XMD2000/10 |
4000 |
7200 |
44 |
22 |
DN80 |
DN65 |
XMD2000/20 |
10000 |
4900 |
44 |
45 |
DN80 |
DN65 |
XMD2000/30 |
20000 |
2850 |
44 |
90 |
DN150 |
DN125 |
XMD2000/50 |
60000 |
1100 |
44 |
160 |
DN200 |
DN150 |